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显微镜成像系统的要求 |
| 文章来源： 发布时间：2015/5/5 17:01:37 |
随着人们对生命过程的研究已深入到了分子水平, 这必然对发展从微观上研究生命物质结构和运动规律的技术和手段提出新的要求。生命活动的基本单元是细胞，而执行和实现生命活动的是细胞中的各种生物分子/生物纳米结构如蛋白质酶、信号转导蛋白及复合体、离子通道，以及由生物纳米结构组成的分子器件如核糖体、线粒体等。
生命活动中的各种复杂功能，几乎都是通过生物分子在纳米尺度上的相互作用来完成的。因此，发展生物单分子和单细胞水平高分辨实时动态纳米检测技术，为我们认识和了解生物分子和生物纳米结构如何组织成为功能单元以及细胞如何协调生命的有序活动提供了强大的研究手段和新的机遇，将使人们在生命过程发生的最基本的层次上揭示生命的奥秘，在认识和发现疾病发生发展分子机制的基础上进行疾病的有效诊治和预防。
本文由|沪杏显微镜 http://www.shhx17.com/shhx17/com_pro.asp?sid=17&bid=13 整理提供
然而，如何在活细胞体系，单分子单细胞水平上对生物分子和生物纳米结构进行高分辨的实时动态纳米检测和定量表征，仍然是生命科学研究中最具挑战性的前沿科学问题。主要表现为：
（1）由于单个荧光分子的信号较弱，活细胞背景信号强，噪声干扰严重，单分子成像的信噪比较低，使得单分子定位和追踪的空间和时间分辨率降低。
（2）单分子荧光信号容易光漂白，追踪时间短。
（3）对单分子进行动态跟踪需要较高的时间分辨成像，降低了曝光时间，对成像仪器特别是探测器的灵敏度提出了更高的要求。
现在普遍使用且基本能够胜任上述要求的单分子宽场成像探测器是EMCCD，但是Hamamatsu公司和Andor公司最近推出了科学级sCMOS，可以同时满足科学应用中对于低噪声、高帧速、宽动态范围及高分辨率的要求。
为了测试EMCCD和sCMOS在灵敏度方面的差异，在上海沪杏光学自己搭建的全内反射荧光显微镜上做了单荧光分子成像实验，其中测试的EMCCD为Andor的iXon+ DU897单光子探测EMCCD相机，sCMOS分别为Andor和Hamamatsu的科学级sCMOS相机，激发光为488nm连续输出氩离子激光，显微物镜使用Huxing的TIRFM专用100X油浸物镜，标记荧光为固定在盖玻片上的ATTO565染料。图中分别是Andor的EMCCD、Andor的sCMOS和Hamamatsu的sCMOS实物照片。
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上海沪杏光学仪器有限公司主要生产和销售金相显微镜、偏光显微镜、体视显微镜、检测显微镜、维氏硬度计等光学设备。 销售部热线： 021-20227929 18801751626
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